二油酰基磷脂酰乙醇胺-四甲基罗丹明在流式细胞术细胞分选中的应用
瑞禧生物2025-08-12   作者:lkr   来源:
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流式细胞术细胞分选是一种强大的技术,能够基于细胞的物理和化学特性,从异质性细胞群体中高效分离出特定细胞亚群。DOPE-TAMRA 作为一种荧光标记物,在这一过程中发挥着关键作用。

DOPE-TAMRA结构式 

图为:DOPE-TAMRA结构式

 

DOPE,即二油酰基磷脂酰乙醇胺,具有良好的膜融合能力,可帮助构建稳定的脂质体结构。TAMRA 则是羧基四甲基罗丹明,是罗丹明类荧光素衍生物,有着荧光特性,在氩离子激光激发下,其吸收峰在 547nm,发射峰在 573nm(pH = 8.0 时) ,能发出明亮的红色荧光,且对环境变化相对稳定,便于准确检测。

 

在细胞分选实验中,先将 DOPE-TAMRA 整合到脂质体等载体中,再利用脂质体与细胞膜的融合特性,让 DOPE-TAMRA 标记到目标细胞表面。当标记后的细胞悬液进入流式细胞仪,在高压作用下被压入充满鞘液的流动室,细胞排成单列从喷口喷出。此时,超高频压电晶体使液流断裂成均匀液滴,细胞分散其中。基于 DOPE-TAMRA 发出的特定波长荧光,仪器可识别目标细胞所在液滴,并对其充以特定电荷。带电液滴在高压电场的偏转板作用下,落入相应收集容器,实现目标细胞的分离。

DOPE结构式 

图为:DOPE结构式

 

这种应用有着诸多优势。比如,在tumor细胞研究中,通过标记tumor细胞表面的特定受体,可准确分选tumor细胞,用于后续的tumor生物学特性研究、药物筛选等。并且,DOPE-TAMRA 标记过程对细胞活性影响较小,分选后的细胞能保持良好状态,可直接用于培养、核酸提取、单细胞 PCR 扩增等实验,进一步开展细胞基因、蛋白、功能水平的深入探究。此外,其红色荧光可与其他绿色等荧光标记物搭配,在多色荧光标记实验中,实现对多种细胞亚群的同时分选与分析,大大提高了实验效率与研究的全面性。