产品介绍:
5-HMSiR-Hochest由三部分核心结构通过连接臂共价连接而成:
荧光基团:5-HMSiR(硅基罗丹明),含硅杂蒽环骨架,是近红外荧光的来源(激发/发射波长位于 650-680 nm),光稳定性良好;
靶向基团:Hoechst 衍生物(如 Hoechst 33342 的核心结构),含双苯并咪唑环,可特异性结合 DNA 的 AT 富集区域,实现细胞核靶向;
连接臂:通常为聚乙二醇(PEG)链或碳链(如 C3-C6),减少两个功能基团的空间位阻,确保荧光特性与靶向性互不干扰。
使用方法与注意事项
1 标准染色流程(活细胞)
储备液制备:用 DMSO 溶解 5-HMSiR-Hoechst,配制 1 mM 储备液(-20℃避光保存,可存放 6 个月);
工作液配制:用细胞培养液稀释储备液至 0.1-1 μM(推荐 0.5 μM,根据细胞类型调整);
染色:将工作液加入细胞培养皿,37℃孵育 15-30 分钟;
洗涤:用 PBS 洗 2-3 次,去除未结合的探针;
成像:使用激光共聚焦显微镜,选择 640 nm 激发光,670-690 nm 发射滤光片。
2 固定细胞/组织染色
固定:4% 多聚甲醛固定 10 分钟,PBS 洗涤;
染色:0.5 μM 工作液室温孵育 10 分钟,洗涤后成像(无需透膜处理,探针可透过固定后的细胞膜)。
3 关键注意事项
浓度控制:工作浓度>5 μM 可能导致非特异性染色(如细胞质背景增强),需预实验优化;
避光操作:尽管光稳定性高,仍需避光染色和保存,避免强光直射;
与其他染料兼容:多色成像时,先染 5-HMSiR-Hoechst,再染其他染料(避免近红外光对其他荧光的漂白);
活细胞培养:染色后可继续培养(信号维持 4-6 小时),适合动态追踪,但需避免长时间孵育(可能积累Poison 性)。
名称:5-HMSiR-Hochest
分子式:C54H57N9O3Si
产品规格:mg/g
纯度:95%+
保存方式:-20℃以下,避光,防潮
保质期限:12个月
用途:科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体
图:5-HMSiR-Hochest
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