sulfo Cy5.5-Glu 作为一种荧光标记探针,其稳定性直接影响实验结果的可靠性,深入分析其稳定特性及影响因素具有重要意义。
图为:sulfo Cy5.5-Glu结构式
该探针由磺化 Cy5.5 荧光基团与谷氨酰胺(Glu)通过共价键连接而成。磺化修饰赋予其良好的水溶性,在生理缓冲液中不易聚集,这是其基础稳定性的重要保障。在干燥避光条件下,sulfo Cy5.5-Glu 可长期储存,荧光性能衰减缓慢,通常在-20℃密封保存时,有效期可达 12 个月以上。
溶液环境对其稳定性影响明显。pH 值是关键因素之一,在中性 pH(6.5-7.5)条件下,探针分子结构稳定,荧光强度波动小;当 pH 低于 5 或高于 9 时,共价键易发生水解,导致荧光基团与 Glu 分离,荧光量子产率明显下降。温度同样不可忽视,室温(25℃)下可稳定存放数天,而 37℃以上的高温会加速分子氧化,尤其在有氧环境中,荧光淬灭速率加快。
图为:Cy5.5结构式
光照是另一个重要影响因素。sulfo Cy5.5 的荧光发射波长位于近红外区(约 694nm),虽对可见光相对稳定,但长时间暴露于紫外光或强光下,会引发光漂白现象,导致荧光信号不可逆衰减。实验操作中需尽量缩短光照时间,并采用避光容器储存。
此外,生物基质中的酶类也会影响其稳定性。细胞培养液或血清中的肽酶可能水解连接键,使探针降解。因此,在细胞实验中,通常需现配现用,并控制孵育时间,以减少酶解带来的干扰。
通过优化储存条件(低温、避光、干燥)和实验环境(中性 pH、适宜温度),可有效维持 sulfo Cy5.5-Glu 的稳定性,为谷氨酰胺转运体标记、代谢成像等研究提供可靠的工具支持。