蛋白交联剂,即蛋白质交联剂,是一类小分子化合物,具有2个或者更多的针对特殊基团(-NH2、-COOH、-HS等)的反应性末端,可以和2个或者更多的分子分别偶联,从而使这些分子结合在一起。
常用蛋白交联剂及其配置方法
DTT(二硫苯醚):
常用浓度:1M。
配置步骤:称取适量的DTT粉末,加入足够的无水乙醇溶解至所需体积,过滤并分装保存。
DSP(二硫代异硫氰酸酯):
常用浓度:10mM。
配置步骤:称取适量的DSP粉末,加入足够的有机溶剂(如二甲基亚砜)溶解至所需体积。
可与交联剂反应的基团
游离氨基(赖氨酸ε或N末端的氨基)
巯基(半胱氨酸)
羧基(天冬氨酸,谷氨酸,末端羧基)
羟基(丝氨酸或苏氨酸)
酮基,醛基,糖链
苯酚衍生物(苯丙氨酸,色氨酸,酪氨酸)
放射性基团:R-N3
交联剂反应基团和反应指向性一览:
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