FITC-LCA 结合共聚焦显微镜观察细胞糖基化动态变化
瑞禧生物2025-06-09   作者:lkr   来源:
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细胞糖基化作为一种关键的蛋白质翻译后修饰,在细胞识别、信号传导、immunity反应等众多生理过程中扮演着重要角色。对细胞糖基化动态变化的准确观察,有助于深入理解细胞的生命活动机制以及相关疾病的发病机理。FITC-LCA(异硫氰酸荧光素标记的小扁豆凝集素)与共聚焦显微镜的结合,为这一研究提供了有力工具。

FITC-LCA结构式 

图为:FITC-LCA结构式

 

FITC-LCA 具备特性。小扁豆凝集素(LCA)能够特异性地识别并结合细胞表面的 α- 连接甘露糖残基,而 FITC 作为常用的绿色荧光染料,赋予了 LCA 可视化的能力。其激发波长为 495nm,发射波长为 515nm,呈现出明亮的绿色荧光 ,在多色成像实验中也能很好地适配。在与细胞作用时,将细胞与 FITC-LCA 溶液按合适比例混合孵育,LCA 凭借其对甘露糖残基的亲和性,会选择性地结合到细胞表面相应糖链结构上,使细胞表面携带荧光标记。

 

共聚焦显微镜在这一研究体系中发挥着核心作用。它以激光作为光源,基于共轭聚焦原理工作。与传统光学显微镜相比,共聚焦显微镜可对样品进行断层扫描成像,能实现无损伤观察细胞的三维空间结构。利用immunity荧光标记的特性,结合 FITC-LCA 对细胞糖基化位点的标记,不仅能观察固定细胞,还能对活细胞的糖基化动态变化进行实时监测。在细胞迁移过程中,通过共聚焦显微镜持续观察,可发现 FITC-LCA 标记的糖基化位点在细胞膜上的分布会随细胞移动而改变,这可能与细胞迁移时的黏附、伸展等活动相关。在细胞增殖过程中,不同时期细胞表面糖基化水平也存在差异,早期分裂旺盛阶段,某些糖基化位点的荧光强度会增强,暗示着糖基化修饰对细胞增殖活动的调节作用。

FITC结构式 

图为:FITC结构式

 

在疾病研究方面,该技术也具有重要意义。以tumor细胞为例,tumor细胞的糖基化模式与正常细胞存在差异。通过 FITC-LCA 结合共聚焦显微镜观察,可发现tumor细胞表面特定糖基化位点增多或分布异常,这可能影响tumor细胞的侵袭、转移能力。

 

FITC-LCA 结合共聚焦显微镜为细胞糖基化动态变化研究提供了高灵敏度、高分辨率的观察手段,随着技术的不断完善,有望在基础生物学研究以及疾病诊断、Treatment 等领域发挥更大作用。