细胞外基质（ECM）的刚度作为重要的物理微环境因素，调控细胞的增殖、分化、迁移等行为。FITC-FN（异硫氰酸荧光素标记的纤连蛋白）凭借其独特性质，成为探究 ECM 刚度与细胞行为关系的有力工具。

图为：FITC-FN结构式

FITC 是一种常用的荧光染料，在 495nm 激发光下发出明亮的绿色荧光；纤连蛋白（FN）作为 ECM 的关键蛋白，能与细胞表面整合素受体特异性结合。将 FITC 标记到 FN 上形成 FITC-FN 后，可通过荧光显微镜直观观察其在不同刚度基质上的分布与构象变化，同时明确细胞对它的响应。

在实验中，通过调整聚丙烯酰胺水凝胶等基质的交联程度，制备具有不同弹性模量的仿生 ECM，并将 FITC-FN 包被于基质表面。当细胞接种于其上后，利用荧光成像技术可发现，在较硬的基质上，FITC-FN 呈现更为伸展的构象，细胞铺展面积增大，肌动蛋白骨架更为致密，细胞增殖速率加快；而在较软的基质上，FITC-FN 相对蜷缩，细胞形态趋于圆形，迁移行为更为活跃，且部分细胞会向神经细胞或脂肪细胞等方向分化。

图为：FITC结构式

FITC-FN 不仅能可视化观察细胞与 ECM 的相互作用，还揭示了 ECM 刚度通过影响 FN 的机械信号传导，调节细胞内的力学转导通路，如 YAP/TAZ 通路、FAK 通路等，进而调控细胞命运。未来，基于 FITC-FN 的研究有望进一步阐明细胞-ECM 相互作用机制，为组织工程、再生医学及疾病Treatment 提供新的理论依据。