FITC-Collagen Pro产品介绍:
FITC-胶原蛋白Pro是一种将异硫氰酸荧光素(FITC)与胶原蛋白Pro结合的荧光标记化合物。FITC具有高吸收率、优良的荧光量子产率和良好的水溶性,其异硫氰酸基团可与胶原蛋白的氨基末端或伯胺反应,实现胶原蛋白的荧光标记。标记后的胶原蛋白Pro在荧光显微镜下能发出绿色荧光,便于追踪其在生物体内的分布和动态变化。该产品应用于细胞外基质研究、组织工程、生物成像等领域,如追踪胶原蛋白在组织或生物材料中的分布,研究其降解与重塑过程。FITC-胶原蛋白Pro通常需要在避光、干燥、低温(如-20℃)的条件下储存,以保持其稳定性和活性,并可加入适量的NaN₃作为防腐剂。该产品仅限用于科研实验,不用于临床和诊疗。
FITC-Collagen Pro产品科普:
一、产品特性
高荧光亮度:得益于 FITC 强大的荧光性能,FITC-Collagen Pro 在受到合适波长的激发光照射时,能够发出极为明亮的绿色荧光。这一特性使得即使在复杂的生物样本中,也能够凭借其强烈的荧光信号被轻易地观察和检测到,极大地提高了检测的灵敏度。
良好的稳定性:一方面,FITC 与胶原蛋白之间通过共价键连接,这种化学键的稳定性确保了在实验过程中以及生物体内复杂的环境下,FITC 不会轻易从胶原蛋白分子上解离,从而保证了荧光信号的持续稳定输出。另一方面,胶原蛋白本身具有较好的稳定性,其三股螺旋结构使其能够抵抗一定程度的物理、化学和生物因素的影响,进一步保障了 FITC-Collagen Pro 整体的稳定性。
二、制备工艺
胶原蛋白的提取与纯化:首先从合适的生物来源提取胶原蛋白。提取过程采用一系列物理和化学方法,如酶解法、酸解法等,将胶原蛋白从组织中释放出来。随后,通过盐析、透析、柱层析等多种纯化技术,去除杂质和其他蛋白质,得到高纯度的胶原蛋白。以从牛跟腱中提取 I 型胶原蛋白为例,先将牛跟腱组织清洗、切碎,用胃蛋白酶在酸性条件下进行酶解,然后通过硫酸铵分级沉淀初步分离胶原蛋白,再经过透析去除盐分,最后采用凝胶过滤层析进一步纯化,得到高纯度的 I 型胶原蛋白。
FITC 标记反应:将纯化后的胶原蛋白溶解于合适的缓冲液中,通常为磷酸盐缓冲液(PBS)或 Tris-HCl 缓冲液,调节 pH 值至 7.0-8.0,以创造适宜的反应环境。然后,缓慢加入 FITC 的二甲基亚砜(DMSO)溶液,在低温(4℃左右)、避光的条件下进行搅拌反应。反应过程中,FITC 的异硫氰酸酯基团与胶原蛋白分子中的氨基发生亲核加成反应,形成稳定的硫脲键,从而实现 FITC 对胶原蛋白的标记。反应时间一般为 2-4 小时,期间需要密切监测反应进度,可以通过取样进行荧光光谱分析或高效液相色谱(HPLC)检测来确定反应的程度。
产物分离与纯化:标记反应结束后,反应体系中会存在未反应的 FITC、DMSO 以及其他副产物,需要通过分离和纯化步骤去除这些杂质。常用的方法是透析,将反应液装入透析袋中,放入大量的缓冲液(如 PBS)中进行透析,通过不断更换透析外液,使小分子杂质逐渐扩散到透析外液中,而 FITC-Collagen Pro 则保留在透析袋内。透析时间一般为 12-24 小时,期间每隔一定时间更换透析外液,以确保杂质充分去除。此外,还可以采用凝胶过滤层析、离子交换层析等方法进一步纯化产物,提高 FITC-Collagen Pro 的纯度。最后,将纯化后的 FITC-Collagen Pro 溶液通过冷冻干燥技术制成冻干粉,以便于储存和运输。
中文名称:异硫氰酸荧光素标记胶原蛋白Pro
英文名称:FITC-Collagen Pro
别称:FITC-胶原蛋白Pro
纯度:95%+
溶解性:溶于有机溶剂
保存方式:冷藏
用途:科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体
图片:FITC结构式
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