2025-06-19 作者：ws 来源：产品介绍：
FITC（异硫氰酸荧光素）：
一种常用的荧光探针，激发波长约 495nm，发射波长约 520nm，呈现绿色荧光。其化学性质活泼，易与氨基（-NH₂）反应形成稳定的硫脲键，常用于标记生物分子（如蛋白质、多肽）或纳米材料，以便于荧光成像和追踪。
PEG（聚乙二醇）：
具有良好的水溶性、生物相容性和柔韧性，可延长共轭物的血液循环时间（减少免疫清除），降低Poison 性和抗原性。PEG 链段的长度（分子量）可根据需求调整（如 500、1000、2000、5000 Da 等）。
COOH（羧基）：
末端羧基（-COOH）是重要的反应性官能团，可在活化剂（如 EDC/NHS）作用下与氨基、羟基等反应，形成酰胺键或酯键，便于连接抗体、多肽、药物或其他功能性分子。
合成流程
步骤 1：FITC 与 PEG-NH₂的共轭反应（荧光标记）
溶液配制：
将 FITC 溶解于 DMSO 中，制备 10-20 mg/mL 的储备液（避光操作，防止 FITC 光淬灭）。
将 PEG-NH₂溶解于 PBS（pH 8.5）或 DMSO 中，浓度为 5-10 mg/mL，用 1 M NaOH 调节 pH 至 8.0-9.0（弱碱性条件促进异硫氰酸酯与氨基的反应）。
混合反应：
在磁力搅拌下，将 FITC 溶液缓慢滴加到 PEG-NH₂溶液中（FITC 与 PEG-NH₂的摩尔比通常为 1:1 至 3:1，过量 FITC 可提高标记率，但需后续纯化）。
反应在室温下避光搅拌 6-12 小时，或 4℃过夜（延长反应时间可提高产率，但避免过度反应导致 PEG 链交联）。
初步纯化：
反应结束后，用 0.1 M HCl 调节 pH 至中性，通过透析（去离子水，MWCO < PEG 分子量）去除未反应的 FITC，透析时间 24-48 小时（换水 3-5 次），或通过凝胶过滤柱（如 Sephadex G-25）分离共轭物。
步骤 2：PEG-FITC 的羧基化修饰
方法一：利用琥珀酸酐引入羧基
试剂准备：将琥珀酸酐溶解于 DMF 中，浓度为 50-100 mg/mL；将 PEG-FITC 溶解于 DMF 中，浓度 10-20 mg/mL。
反应条件：在冰浴搅拌下，向 PEG-FITC 溶液中加入琥珀酸酐（摩尔比为琥珀酸酐：PEG-FITC = 5:1 至 10:1），滴加 TEA（催化剂量，约为琥珀酸酐摩尔数的 1-2 倍）调节 pH 至 8.0-9.0。
反应时间：室温避光搅拌 12-24 小时，琥珀酸酐的酸酐基团与 PEG 末端的氨基反应，生成羧基（-COOH）和酰胺键。
纯化：反应液用去离子水稀释，通过透析（MWCO 同前）去除小分子副产物，或通过 HPLC 纯化（流动相：水-乙腈，含 0.1% TFA），收集含羧基的 PEG-FITC 组分，冻干得到 FITC-PEG-COOH。
方法二：利用羧酸酯水解引入羧基
前期修饰：先将 PEG-NH₂与羧酸酯（如乙酸乙酯）反应，生成氨基甲酸酯中间体，再与 FITC 共轭，最后通过碱性水解（如 NaOH 溶液）将酯基转化为羧基。
优点：酯水解反应可控，羧基产率高，但步骤较繁琐，需注意避免 FITC 在强碱性条件下的降解（水解 pH 通常控制在 7.5-8.5，低温操作）。
名称：FITC-PEG-COOH
产品规格：mg/g
纯度：95%+
保存方式：-20℃以下，避光，防潮
保质期限：12个月
用途：科研
温馨提示：仅用于科研,不能用于人体
图：FITC-PEG-COOH
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