FITC标记VHPKQHRC-PEG-DSPE的实验操作与注意事项

2025-06-23 作者：ws 来源：

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产品介绍：

FITC-VHPKQHRC-PEG-DSPE化合物是一种多组分偶联分子。

FITC（异硫氰酸荧光素）：

绿色荧光标记基团（激发波长 495nm，发射波长 520nm），用于光学示踪，通过异硫氰酸基团与多肽氨基端偶联。

VHPKQHRC（多肽序列）：

由缬氨酸（V）、组氨酸（H）、脯氨酸（P）、赖氨酸（K）、谷氨酰胺（Q）、组氨酸（H）、精氨酸（R）、半胱氨酸（C）组成的 8 肽，可能具有靶向或功能调节作用（序列中的组氨酸（H）和精氨酸（R）常用于细胞穿透或受体结合，半胱氨酸（C）可形成二硫键或巯基偶联）。

PEG（聚乙二醇）：

柔性亲水链段（常见分子量 500-5000 Da），用于增加分子水溶性、降低免疫原性、延长体内循环时间。

DSPE（二硬脂酰磷脂酰乙醇胺）：

磷脂类脂质（含两条硬脂酸长链），具有脂溶性，可嵌入脂质双分子层（如细胞膜、脂质体），使整个分子具备膜锚定能力。

实验操作与注意事项

1 溶解与制备

溶剂选择：DSPE-PEG 部分具两亲性，可溶于水或乙醇/水混合体系；若多肽含较多疏水性氨基酸（如缬氨酸 V），需用 DMSO 辅助溶解，使用时需稀释至生理缓冲液（如 PBS），避免高浓度溶剂对细胞的Poison 性。

脂质体包埋方法：将 FITC-VHPKQHRC-PEG-DSPE 与其他脂质（如 DPPC、胆固醇）按比例混合，通过薄膜水化法或挤出法制备靶向脂质体，FITC 的荧光强度可用于评估包埋效率（通常需控制标记物摩尔比≤5%，避免影响脂质体稳定性）。

2 靶向性验证关键步骤

多肽受体结合实验：通过表面等离子共振（SPR）或荧光偏振技术，验证 VHPKQHRC 与靶蛋白的结合亲和力（如 Kd 值），确认靶向特异性。

竞争性抑制实验：在细胞摄取实验中，加入过量未标记的 VHPKQHRC 多肽，若 FITC 信号明显降低，证明摄取依赖于多肽-受体相互作用。

3 荧光检测与干扰控制

背景荧光排除：FITC 易受自发荧光（如细胞内脂褐素）或培养基成分（如酚红）干扰，实验需设置 FITC 单标对照组（无多肽）及未标记对照组，通过流式细胞术或共聚焦显微镜进行光谱拆分。

光稳定性优化：FITC 在强光下易淬灭，成像时需使用低功率激光或添加抗淬灭剂（如 DABCO），实验操作全程避光。

名称：FITC-VHPKQHRC-PEG-DSPE

产品规格：mg/g
纯度：95%+

保存方式：-20℃以下，避光，防潮

保质期限：12个月

用途：科研
温馨提示：仅用于科研,不能用于人体

图：FITC

FITC

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