产品介绍:
Galactose(半乳糖):
是一种六碳醛糖,分子结构中含多个羟基(-OH)和醛基(-CHO),天然存在于乳糖和多种糖蛋白中。半乳糖可通过去唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)介导的内吞作用靶向肝细胞,常用于肝靶向药物或探针的设计,其 C-1 位醛基或 C-6 位羟基可作为偶联位点。
PEG(聚乙二醇):
由重复的乙二醇单元组成的线性聚合物,具有良好的水溶性、生物相容性和抗蛋白吸附性。PEG 链段可增加分子的水溶性,降低免疫原性,并通过调节链长(如 PEG2000、PEG5000)控制分子的理化性质(如分子量、柔韧性)。
CHO(醛基,-CHO):
位于 PEG 链的末端官能团,是一种高反应性基团,可与含氨基(-NH₂)、肼基(-NHNH₂)的分子发生希夫碱反应,或与巯基(-SH)发生加成反应,常用于生物分子(如抗体、多肽、蛋白质)的偶联修饰。
实验与应用要点
1 偶联反应条件
希夫碱反应:
pH:最佳反应 pH 为 6.0-7.5,酸性条件促进醛基与氨基的缩合,碱性条件易导致醛基水解;
温度:室温(25℃)反应 1-2 小时,或 4℃过夜,避免高温导致蛋白质变性;
还原剂:反应后加入氰基硼氢化钠(NaCNBH₃)还原希夫碱,形成稳定的仲胺键,提高偶联物的稳定性。
巯基反应:醛基与巯基在中性条件下可发生加成反应生成硫代半缩醛,需确保体系中无游离氧,避免巯基氧化。
2 靶向性与细胞摄取验证
细胞实验:
采用 HepG2 细胞(高表达 ASGPR)和不表达 ASGPR 的细胞系(如 HeLa)对比,通过流式细胞术或荧光显微镜观察 Galactose-PEG-CHO-荧光探针的摄取差异,并用 ASGPR 抗体阻断实验验证靶向特异性。
动物实验:
在荷瘤小鼠模型中,尾静脉注射 Galactose-PEG-CHO 修饰的纳米探针,通过荧光成像或 MRI 观察肝脏及tumour部位的富集,与非靶向探针(如 PEG-CHO)对比,计算靶向效率(肝脏/其他器官的信号强度比)。
3 稳定性与药代动力学
血浆稳定性:PEG 链段可延长循环时间,Galactose-PEG-CHO 在小鼠体内的半衰期约为 2-6 小时(取决于 PEG 分子量),主要通过肝脏清除,少量经肾脏排泄。
储存条件:避光、-20℃冷冻保存,溶解后避免反复冻融,pH 7.4 缓冲液中醛基的半衰期约为 24 小时,需现配现用。
名称:Galactose-PEG-CHO
产品规格:mg/g
纯度:95%+
保存方式:-20℃以下,避光,防潮
保质期限:12个月
用途:科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体
图:Galactose
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