2025-06-24 作者：lkr 来源：5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯产品介绍：
5(6)-TAMRA, SE是5-羧基四甲基罗丹明（5-TAMRA）和6-羧基四甲基罗丹明（6-TAMRA）的混合活性酯，具有明亮的橙色荧光。其琥珀酰亚胺酯基团可与伯胺基团高效反应，形成稳定的酰胺键，适用于多肽、蛋白质、核苷酸等生物分子的标记。该染料激发波长约为546 nm，发射波长约为578 nm，常用于荧光成像、流式细胞术、荧光共振能量转移（FRET）等实验。其良好的水溶性和有机溶剂溶解性，使其在生化分析、药物开发等领域有应用。储存条件为-20℃避光保存，有效期为12个月，运输时建议常温运输，收到货物后需冷冻保存。
5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯产品使用指南：
一、生物分子标记操作流程（以抗体标记为例）
1. 标记前预处理
抗体纯化：通过超滤或透析去除抗体溶液中的游离氨基（如铵盐、甘氨酸等），避免与 TAMRA SE 非特异性结合。
缓冲液选择：标记反应需在 pH 7.0-8.5 的缓冲液中进行（如 PBS、碳酸盐缓冲液），避免强酸 / 强碱环境导致 NHS 酯水解。
2. 标记反应步骤
计算用量：
抗体与 TAMRA SE 的摩尔比建议为 1:5-1:20（根据标记程度需求调整，过高比例可能影响抗体活性）。
例：标记 1 mg IgG（分子量≈150 kDa，物质的量≈6.67 nmol），需 TAMRA SE 的量为 33.35-133.4 nmol（分子量≈596.6 g/mol，对应质量≈20-80 μg）。
溶液配制：
将 TAMRA SE 溶于 DMSO 制成 10 mg/mL 母液（现配），抗体用标记缓冲液稀释至 1-5 mg/mL。
偶联反应：
在冰浴或室温下，将 TAMRA SE 母液缓慢滴入抗体溶液中，避光搅拌反应 1-2 小时（室温反应效率更高，但需控制时间避免过度标记）。
终止与纯化：
反应终止：加入终浓度 0.1 M 的甘氨酸溶液（或 Tris-HCl pH 8.0），室温孵育 15 分钟，封闭未反应的 NHS 酯。
纯化方法：
透析：用 PBS（pH 7.4）透析过夜，更换 3 次缓冲液，去除游离染料。
凝胶过滤色谱：使用 Sephadex G-25 或 PD-10 柱分离标记抗体与游离染料，收集荧光峰组分。
二、标记效率验证与优化
1. 标记率计算
紫外-可见光谱法：
测定标记抗体溶液在 280 nm（蛋白吸收）和 554 nm（TAMRA 吸收）的吸光度值（A₂₈₀和 A₅₅₄）。
计算蛋白浓度（mg/mL）：A₂₈₀ × 稀释倍数 / 抗体的消光系数（如 IgG 的 ε₂₈₀≈1.4 mL・mg⁻¹・cm⁻¹）。
计算 TAMRA 浓度（μM）：A₅₅₄ × 稀释倍数 / ε₅₅₄（TAMRA 的 ε≈89,000 M⁻¹・cm⁻¹）。
标记率（mol/mol）= TAMRA 浓度（μM）× 抗体分子量（kDa） / 蛋白浓度（mg/mL）。
理想标记率：抗体标记通常为 1-3 个染料 / 蛋白分子，过高可能影响活性。
2. 优化策略
反应 pH 调整：若标记率低，可将缓冲液 pH 调至 8.0-8.5（提高氨基解离度，增强亲核反应）。
染料比例优化：通过梯度实验（如 1:5、1:10、1:20 摩尔比）确定最佳标记比例。
中文名称：5(6)-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯
英文名称：5(6)-TAMRA, SE
CAS：246256-50-8
外观：红色固体
纯度：95%+
溶解性：溶于有机溶剂
保存方式：冷藏
保质期限：一年
用途：科研
温馨提示：仅用于科研,不能用于人体
图片：5(6)-TAMRA, SE结构式
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括但不限于：磷脂（PC磷脂、PE磷脂、PG磷脂、PA磷脂、PS磷脂、Cationic Lipids）；聚乙二醇磷脂(PEG-PE、PE-PEG-多肽、PE-化学键-PEG、定制PEG磷脂）；PEG衍生物（NH2-PEG、COOH-PEG、MAL-PEG、NHS-PEG等定制PEG）；聚合物和共聚物（PLGA/PCL/PLA-PEG、PAA、PAMAM、P2VP、P4VP、PNIPAAm、PMMA、PS等定制共聚物）；纳米颗粒（纳米金、磁性纳米颗粒、二氧化硅纳米颗粒、量子点、上转换纳米颗粒、微球、其他无机纳米颗粒、定制纳米颗粒）；荧光染料（基础染料：花菁荧光染料、Bodipy染料、香豆素染料等，以及荧光探针、荧光标记蛋白 荧光标记糖、荧光标记多肽、定制荧光染料）；小分子化合物（单分散PEG、蛋白交联剂、点击化学、ADC抗体、药物改性修饰、大环类化合物、protac产品、定制小分子化合物）：纳米载体（脂质体、水凝胶、微球、定制纳米载体）。
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