5-FAM-SE 5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯的产品使用指南
瑞禧生物2025-06-26   作者:lkr   来源:
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5-FAM-SE产品介绍:

5-FAM-SE是一种常用的荧光标记试剂,由5-羧基荧光素(5-FAM)与琥珀酰亚胺酯基团结合而成。该化合物具有绿色荧光特性,激发波长约为494 nm,发射波长约为521 nm,适用于生物分子的荧光标记。5-FAM-SE可与含伯胺基团的生物分子(如蛋白质、多肽、抗体、寡核苷酸等)在温和条件下发生反应,形成稳定的酰胺键,实现对生物分子的高效标记。该产品应用于蛋白质组学研究、immunity分析、核酸荧光探针制备、细胞成像等领域,为生物医学研究提供了有力的工具。储存时需密封避光,置于阴凉、干燥、通风处,建议储存温度为-20℃以下。

 

5-FAM-SE产品使用指南:

一、产品特性

荧光特性:5-FAM-SE 是一种绿色荧光染料,具有高荧光强度和良好的光稳定性,适用于高灵敏度的荧光检测。

反应活性:其琥珀酰亚胺酯基团(NHS ester)可与生物分子中的伯胺(-NH₂)反应,形成稳定的酰胺键,适用于蛋白质、肽、抗体和核苷酸的标记。

水溶性:5-FAM-SE 具有良好的水溶性,但通常溶解于有机溶剂(如 DMSO、DMF)中,再稀释至水相缓冲液中使用。

 

二、使用步骤

溶解

将 5-FAM-SE 粉末溶解于无水 DMSO 或 DMF 中,推荐浓度为 10 mM(4.73 mg/mL)。

注意:避免剧烈搅拌或震荡,以防荧光猝灭。

标记反应

将待标记的生物分子(如蛋白质、抗体)溶解于适当的缓冲液中(如 PBS,pH 7.2-8.0)。

将 5-FAM-SE 溶液缓慢加入生物分子溶液中,轻轻混匀。

推荐摩尔比:5-FAM-SE : 生物分子 = 5:1 至 20:1(根据生物分子的胺基含量调整)。

反应条件:室温或 4℃ 避光反应 1-2 小时,或 37℃ 反应 30 分钟。

终止反应

加入过量的甘氨酸(如 50 mM)或 Tris-HCl(pH 8.0)缓冲液,室温孵育 15 分钟,以淬灭未反应的 5-FAM-SE。

纯化

使用透析、凝胶过滤或离心超滤等方法去除未反应的 5-FAM-SE 和小分子杂质。

注意:避免光照和高温,以防荧光淬灭。

检测与分析

使用荧光光谱仪测定标记产物的荧光强度(Ex: 488 nm, Em: 520 nm)。

通过 SDS-PAGE、HPLC 或质谱等方法验证标记效率。

 

中文名称:5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯

英文名称:5-FAM-SE

别称:5-羧基荧光素琥珀酰亚胺活性酯

外观:黄色至橙色固体或红色固体

纯度:95%+

溶解性:溶于有机溶剂

保存方式:冷藏

保质期限:一年

用途:科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体

图片:5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯结构式

5-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯结构式 

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