微生物发酵法制备透明质酸(10k)的制备方法
瑞禧生物2025-06-27   作者:ZJ   来源:
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产品介绍:

透明质酸(10k)是一种分子量准确至10,000Da的生物高分子,具有润滑性和保湿性。该产品常用于流式细胞术检测,通过荧光标记(如CY5-HA18k)实现多参数细胞分析。此外,其与生物素偶联的衍生物(HA-Biotin)可用于蛋白质纯化或生物分子检测,拓展了其在分子生物学中的应用。

 

制备方法:

 

一、菌种准备

菌种筛选与优化:从自然界筛选高产透明质酸的链球菌等菌株,通过基因测序、诱变处理(如紫外线、化学诱变)优化菌株,确保高产、无溶血性及不含透明质酸酶。

菌种保存:将优化后的菌株接种至种子培养基,传代培养后冷冻保存,定期复壮维持活性。

二、发酵培养

培养基配制:配置含酵母提取物、葡萄糖、无机盐等成分的培养基,灭菌后备用。

发酵条件控制:将种子液接入发酵罐,控制温度37℃、pH 7.0、溶氧量30%~50%,持续搅拌并通入无菌空气。发酵过程中定时补加葡萄糖、氮源等营养物质,发酵周期约40~48小时。

三、提取纯化

发酵液预处理:发酵结束后,离心或过滤去除菌体,收集上清液。

沉淀提取:向上清液中加入2~3倍体积乙醇,静置沉淀透明质酸,离心收集沉淀物。

溶解与纯化:沉淀物用去离子水溶解后,通过离子交换层析去除核酸、蛋白质等杂质,再经凝胶过滤层析进一步纯化。

四、精制与干燥

分子量调控:采用过氧化氢降解法控制分子量至10,000 Da,并通过超滤膜去除小分子杂质。

除菌与干燥:溶液经0.22 μm滤膜除菌后,冷冻干燥得到白色粉末。

 

中文名称:透明质酸(10k

英文名称:Hyaluronic Acid

别称:玻璃酸、糖醛酸

外观:白色或类白色的粉末

纯度:95%+

溶解性:甘油、水

保存方式:2-8℃,避光,防潮

保质期限:12个月

用途:科研

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体

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微生物发酵法制备透明质酸(10k)的制备方法 

西安瑞禧生物科技有限公司主要经营的产品合成磷脂,脂质体的定制,包括各种空白对照脂质体,载药脂质体,装载DNA或小分子脂质体,长循环脂质体,阳离子脂质体,荧光脂质体及其他复杂的脂质体试剂。

 

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