逆向蒸发法制备脂质体载mRNA的制备方法
瑞禧生物2025-07-03   作者:ZJ   来源:
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产品介绍:

脂质体载 mRNA 产品采用阳离子脂质与辅助脂质配比优化策略,通过静电相互作用实现 mRNA 高效包封。脂质体表面带正电荷(Zeta 电位约 + 30 mV),与带负电的 mRNA 形成复合物,包封率高达 95% 以上。冷冻透射电镜显示,mRNA 均匀包裹于脂质体疏水层与亲水腔室之间,形成稳定核-壳结构,有效保护 mRNA 免受核酸酶降解。琼脂糖凝胶电泳证实,包封后的 mRNA 在血清环境中 72 小时仍保持完整,为基因递送提供可靠保障。

 

制备方法:

 

有机相制备
将磷脂(如DSPCDOPE)、胆固醇及阳离子脂质(如DOTAP)溶于氯仿或乙醚等有机溶剂,形成均匀溶液。阳离子脂质通过正电荷与mRNA的负电荷静电结合,是包封的关键成分。

 

水相混合
加入含mRNA的缓冲液(如柠檬酸盐缓冲液,pH 4.0),形成油包水(W/O)乳剂。mRNA需提前纯化并调整浓度,确保与脂质比例适宜。

 

超声处理
短时超声(如10-30秒)使乳剂均匀分散,形成稳定的反胶束结构。此步骤需控制温度(如4℃)以防止mRNA降解。

 

溶剂蒸发
旋转蒸发去除有机溶剂,形成凝胶态。此时磷脂双分子层包裹mRNA,形成脂质体前体。

 

水化与纯化
加入磷酸盐缓冲液(PBSpH 7.4)水化凝胶,通过超速离心或透析去除未包封的mRNA和有机溶剂残留。最终产物为单层脂质体,粒径约80-200nm

 

中文名称:脂质体包裹信使核糖核酸

英文名称:Liposome-encapsulated Messenger RNA

别称:Liposome-mRNAmRNA 脂质体、脂质纳米粒载 mRNA

外观:液体

纯度:95%+

溶解性: 水、磷酸盐缓冲液(PBS

保存方式:2-8℃,避光,防潮

保质期限:12个月

用途:科研

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体

图片:脂质体

逆向蒸发法制备脂质体载mRNA 

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