线粒体红色荧光探针是一类应用于细胞生物学研究的重要工具，能够特异性标记线粒体并发出红色荧光，为线粒体的准确观测与功能研究提供了可视化手段。以经典的 Mito-Tracker Red CMXRos 为例，其作为 X-rosamine 衍生物，设计上巧妙结合了线粒体靶向性与荧光标记功能：该探针可依赖线粒体膜电位，通过被动运输高效穿过活细胞膜，选择性富集于具有生物活性的线粒体中；其分子结构中的弱巯基反应性氯甲基基团，能与线粒体内蛋白的巯基发生共价结合，形成稳定连接，这一特性使其在后续细胞固定、通透化处理等实验步骤中仍能保留标记信号，尽管荧光强度可能因环境变化下降 2-10 倍。Mito-Tracker Red CMXRos 的荧光光谱特性良好（最大激发波长 579 nm，发射波长 599 nm），与绿色荧光探针（如 GFP、FITC）兼容性强，可轻松实现荧光双标或多色共定位实验，为线粒体动态行为、膜电位变化及与其他细胞器的相互作用研究提供了高效、可靠的技术支持。