8 -臂聚乙二醇 -生物素在生物分子标记与检测中的应用
瑞禧生物2025-02-12   作者:ZJ   来源:
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8 -臂聚乙二醇(PEG)犹如一个中心“枢纽”,八条PEG链从核心呈放射状延伸,每条链末端共价连接生物素分子。PEG部分具有出色的亲水性、生物相容性以及柔性,赋予整体化合物良好的水溶性,能有效降低非特异性吸附,确保在复杂生物环境中的稳定性。生物素,作为一种小分子维生素衍生物,对亲和素(Avidin)、链霉亲和素(Streptavidin)具备极强且近乎不可逆的特异性高亲和结合力,亲和常数可达 10¹⁵ M⁻¹数量级,形成极为稳定的非共价复合物。这种独特结构组合,使 8 -臂聚乙二醇 -生物素兼具多元优势,一方面可借助PEG链灵活搭载、分散标记物,另一方面利用生物素靶向锚定,实现高准确检测。

8 -臂聚乙二醇 -生物素在生物分子标记与检测中的应用 

图:生物素

在生物分子标记中的应用

蛋白质标记:在蛋白质研究领域,8 -臂聚乙二醇 -生物素大显身手。科研人员可通过化学反应,将其与目标蛋白质的特定氨基酸残基(如赖氨酸的氨基)结合,利用生物素与链霉亲和素 -荧光素偶联物结合特性,实现蛋白质的荧光标记。相较于传统单标记物,多臂结构能同时负载多个荧光基团或其他功能标签(放射性核素、量子点等),增强标记信号强度,满足对低丰度蛋白质的高灵敏标记需求;且PEG链缓冲,避免标记对蛋白质活性、构象产生过多干扰,确保标记后蛋白质功能相对完整,利于后续如蛋白质 -蛋白质相互作用、酶活性位点探究等研究开展。

核酸标记:对于核酸(DNA、RNA)标记,8 -臂聚乙二醇 -生物素同样具备应用潜力。通过化学合成手段将其修饰于核酸探针末端,在核酸杂交检测技术(如Southern blot、Northern blot、原位杂交等)中,利用生物素与亲和素系统特异性结合,引入酶、荧光物质等报告基团,可清晰、特异地呈现目标核酸序列在样本中的分布与含量信息。与常规核酸标记物相比,多臂PEG修饰能改善探针水溶性、稳定性,减少非特异性杂交背景噪音,提升检测准确性与灵敏度,尤其在痕量核酸检测场景优势凸显。

8 -臂聚乙二醇 -生物素在生物分子标记与检测中的应用 

图:聚乙二醇

在生物分子检测中的应用

免疫检测:在酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫荧光检测等免疫分析技术里,8 -臂聚乙二醇 -生物素发挥关键效能。以ELISA为例,将生物素化抗体(借助 8 -臂聚乙二醇 -生物素修饰)与样本孵育,结合目标抗原后,再加入酶标亲和素,通过酶催化底物显色反应,放大检测信号。多臂PEG结构增加抗体可修饰位点,提高生物素化效率,增强信号放大倍数;同时改善抗体在溶液中分散性、稳定性,减少因聚集导致的假阳性,提升检测精密度,实现对微量抗原(如illness相关蛋白标志物)的高灵敏定量检测,应用于传染病判断、tumor标志物筛查等临床实践。

生物传感器应用:在基于光学、电化学生物传感器构建中,8 -臂聚乙二醇 -生物素是理想修饰材料。在光学传感器方面,如表面等离子体共振(SPR)传感器,将其修饰于传感芯片表面,结合生物素 -亲和素特异性识别捕获目标生物分子,借助PEG链调控传感界面微环境(亲疏水性、电荷分布等),优化生物分子固定效率与活性,实现对目标物高灵敏、实时动态检测,监测生物分子相互作用动力学参数;电化学生物传感器中,利用生物素与亲和素结合固定酶等电活性物质,PEG链绝缘防干扰、促进电子传递,拓宽检测线性范围,提升传感器稳定性与重现性,用于血糖、神经递质等生物小分子快速检测。