产品介绍:
连霉亲和素-聚苯乙烯微球(3μm)表面携带大量SA分子,比表面积高,可高效负载生物素化分子(如荧光标记抗体),实现信号放大。在immunity检测中,作为ELISA固相载体,检测灵敏度较传统方法提升10倍;在流式细胞术中,标记细胞表面生物素化抗原,荧光强度增强5-8倍。
制备方法:
聚苯乙烯微球的合成:采用乳液聚合法合成聚苯乙烯微球,将苯乙烯单体、引发剂(如偶氮二异丁腈)、乳化剂(如十二烷基硫酸钠)按一定比例加入去离子水中,通氮气除氧 30 分钟后,在 70-80℃下搅拌反应 24-48 小时。通过调节单体浓度、引发剂用量和反应时间控制微球粒径,合成 3μm 左右的聚苯乙烯微球。反应结束后,将微球混悬液离心(3000rpm,10 分钟),用去离子水反复洗涤 3-5 次,去除未反应的单体和乳化剂,得到纯化的聚苯乙烯微球混悬液。
微球表面活化:取纯化后的聚苯乙烯微球,加入活化剂溶液(如碳二亚胺类活化剂 EDC 与 N-羟基琥珀酰亚胺 NHS 的混合溶液,摩尔比 1:1),微球浓度控制在 10mg/mL,室温下搅拌活化 1-2 小时,使微球表面的羧基(或其他活性基团)活化,形成活性酯中间体,便于与链霉亲和素的氨基反应。活化结束后,离心洗涤微球 2-3 次,去除过量的活化剂。
链霉亲和素修饰:将活化后的聚苯乙烯微球重分散于 PBS 缓冲液(pH 7.4)中,加入链霉亲和素溶液,微球与链霉亲和素的质量比控制在 10:1-5:1,室温下缓慢搅拌反应 4-6 小时,使链霉亲和素通过酰胺键共价结合到微球表面。反应过程中需持续通氮气,防止蛋白氧化。
封闭与纯化:反应结束后,向混悬液中加入封闭剂(如牛血清白蛋白 BSA 或甘氨酸溶液,浓度 1%),室温搅拌 1-2 小时,封闭微球表面未反应的活性位点,减少非特异性吸附。随后,将微球混悬液离心(3000rpm,10 分钟),用 PBS 缓冲液反复洗涤 3-5 次,去除未结合的游离链霉亲和素和封闭剂。
分散与保存:将纯化后的链霉亲和素-PS微球重分散于含防腐剂(如叠氮化钠,浓度 0.02%)的 PBS 缓冲液中,调整微球浓度至 10mg/mL,振荡或超声处理使微球均匀分散,分装后置于 2-8℃冷藏环境中避光保存。通过检测微球的生物素结合容量、粒径分布和分散性,确保产品质量合格。
中文名:连霉亲和素-聚苯乙烯微球(3μm)
英文名:Streptavidin-Polystyrene Microspheres (3μm)
别称:链霉亲和素修饰PS微球、生物素-亲和素系统微球、磁性/非磁性功能化PS微球
外观:白色或淡黄色固体粉末
溶解性: 不溶于水及常见有机溶剂
纯度:95%+
保存方式:-20℃,避光,防潮
保质期限:12个月
用途:科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体
图片:
西安瑞禧生物科技有限公司主要经营的产品合成磷脂,脂质体的定制,包括各种空白对照脂质体,载药脂质体,装载DNA或小分子脂质体,长循环脂质体,阳离子脂质体,荧光脂质体及其他复杂的脂质体试剂。
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