产品介绍:
TCO-NHS 全称为 trans-Cyclooctene-N-Hydroxysuccinimide Ester(反式环辛烯-琥珀酰亚胺酯),是一种典型的生物正交反应试剂。
TCO-NHS 核心功能是通过琥珀酰亚胺酯(NHS)基团与生物分子的氨基偶联,再利用反式环辛烯(TCO)基团与叠氮化物(-N₃)发生 “应变促进叠氮-炔环加成反应(SPAAC)”,实现生物分子的特异性标记与偶联。其兼具 “反应高效性”“位点特异性” 和 “生物相容性”,在生物医学、分子生物学等领域应用。
反应条件
pH 控制:NHS 酯与氨基反应的最佳 pH 为 6.5-7.5(pH<6 时氨基质子化,反应活性下降;pH>8 时 NHS 酯水解加快);若目标分子(如酶)在中性 pH 下不稳定,可适当调整至 pH 6.0-6.5,但需延长反应时间(如 60 分钟)。
温度控制:室温(25℃)适合大多数生物分子;对热敏感的分子(如抗体、病Poison 蛋白)建议 4℃反应,反应时间延长至 2-4 小时;避免高温(>37℃),以防生物分子变性。
浓度控制:TCO-NHS 与目标分子的摩尔比建议为 10:1-50:1(过量 TCO-NHS 确保氨基充分修饰);若目标分子浓度低(如 < 0.1 mg/mL),可提高摩尔比至 100:1,但需在反应后通过透析或柱层析去除未反应的 TCO-NHS。
使用注意事项
避免 NHS 酯水解:TCO-NHS 需用无水有机溶剂(如 DMSO)溶解,再缓慢滴入水性反应体系(滴加速度 < 1 滴/秒),避免局部浓度过高导致水解;反应体系中可加入 0.1% 叠氮化钠(NaN₃)抑制微生物污染,但需确保 NaN₃不与 TCO 反应(NaN₃的叠氮基团需在后续步骤加入)。
减少副反应:若目标分子含巯基(-SH),需先通过马来酰亚胺修饰封闭巯基,避免巯基与 NHS 酯发生副反应;反应后需通过透析(截留分子量 3-10 kDa)或脱盐柱去除未反应的 TCO-NHS,避免干扰后续 SPAAC 反应。
储存与取用:固体 TCO-NHS 需分装为小剂量(如 1 mg/管),避免反复冻融;取用后立即密封,放回-20℃冰箱;若发现粉末变色(如变黄),说明已降解,不可再使用。
名称:TCO-NHS
CAS号:1191901-33-3
分子式:C13H17NO5
产品规格:mg/g
纯度:95%+
保存方式:-20℃以下,避光,防潮
保质期限:12个月
用途:科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体
图:TCO-NHS
西安瑞禧生物科技有限公司经营的产品种类包括但不限于:磷脂(PC磷脂、PE磷脂、PG磷脂、PA磷脂、PS磷脂、Cationic Lipids);聚乙二醇磷脂(PEG-PE、PE-PEG-多肽、PE-化学键-PEG、定制PEG磷脂);PEG衍生物(NH2-PEG、COOH-PEG、MAL-PEG、NHS-PEG等定制PEG);聚合物和共聚物(PLGA/PCL/PLA-PEG、PAA、PAMAM、P2VP、P4VP、PNIPAAm、PMMA、PS等定制共聚物);纳米颗粒(纳米金、磁性纳米颗粒、二氧化硅纳米颗粒、量子点、上转换纳米颗粒、微球、其他无机纳米颗粒、定制纳米颗粒);荧光染料(基础染料:花菁荧光染料、Bodipy染料、香豆素染料等,以及荧光探针、荧光标记蛋白、荧光标记糖、荧光标记多肽、定制荧光染料);小分子化合物(单分散PEG、蛋白交联剂、点击化学、ADC抗体、药物改性修饰、大环类化合物、protac产品、定制小分子化合物):纳米载体(脂质体、水凝胶、微球、定制纳米载体)。
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