2024-12-18 作者：lkr 来源：文献：Delivery of siRNA using folate receptor-targeted pH-sensitive polymeric nanoparticles for rheumatoid arthritis therapy
文献链接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31128293/
作者：Xiangshi Sun, MDa , Shiyan Dong, MDa , Xiangyu Li, MDa , Kongtong Yu, PhDa , Fengying Sun, PhDa , Robert J. Lee, PhDa,b, Youxin Li, PhDa, Lesheng Teng, PhDa
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原文摘要：Systemic delivery of siRNA to target tissues is difficult to achieve owing to its limited cellular uptake and poor serum stability. Herein, polymeric nanoparticles were developed for systemic administration of siRNA to inflamed tissues. The polymeric nanoparticles were composed of PK3 as a pH-sensitive polymer, folate-polyethyleneglycol-poly(lactide-co-glycolide) as a targeting ligand, and a DOTAP/ siRNA core. The polymeric nanoparticles had a mean particle size of 142.6 ± 0.61 nm and a zeta potential of 3.6 ± 0.43 mV. In vitro studies indicated pH-dependent siRNA release from polymeric nanoparticles, with accelerated release at pH 5.0. Cellular uptake was efficient and gene silencing was confirmed by Western blot. In vivo, polymeric nanoparticles were shown to have inflammation-targeting activity and potent therapeutic effects in an adjuvant-induced arthritis rat model. These results suggest that pH-sensitive and folate receptor-targeted nanoparticles are a promising drug carrier for siRNA delivery for rheumatoid arthritis.
FA-PEG-PLGA由聚乳酸羟基乙酸共聚物（PLGA）、聚乙二醇（PEG）和叶酸（FA）组成。PLGA作为材料的主要骨架，提供了良好的生物相容性和可降解性；PEG的加入使得FA-PEG-PLGA具有较好的水溶性，并有助于改善材料的生物相容性；FA作为tumor细胞的靶向配体，能够增加FA-PEG-PLGA对tumor细胞的选择性结合和摄取。由于siRNA的细胞摄取有限和血清稳定性差，很难将其系统递送到靶组织。在此，聚合物纳米颗粒被开发用于系统给药siRNA到Inflammation组织。
图为：FA-siRNA-PPNPs传递示意图
FA-PEG-PLGA在FA-siRNA-PPNPsd制备中的应用：
用乳化液-溶剂蒸发法将DOTAP/siRNA脂质体包裹在FA-PEG-PLGA和PK3中。将溶解于二氯甲烷中的FA-PEG-PLGA和PK3加入到二氯甲烷中的DOTAP/siRNA脂质体中；然后将丙酮加入到二氯甲烷溶液中，形成有机相。将有机相缓慢加入PVA中，然后使用超声处理器继续超声，然后分散在 DEPC处理的水中。将混合物搅拌。在室温下挥发有机溶剂。得到的FA-siRNA-PPNPs离心，用DEPC处理的水洗涤三次，冻干，保存直到使用。荧光标记的纳米颗粒除了用cy5标记的siRNA取代siRNA外，采用相同的方法制备荧光标记的纳米颗粒。
细胞有害性测定：
采用MTT法研究了纳米颗粒的细胞有害性。活化的RAW 细胞在孔板中中培养过夜。然后，细胞用含有不同数量的空FA-PEG-PLGA/ PK3、FA-PEG-PLGA纳米颗粒（定义为FA-PPNPs、FAPNPs）、siRNA加载FA-PEG-PLGA/ PK3、FA-PEG-PLGA纳米颗粒（定义为FA-siRNA-PPNPs、FA-siRNA-PNPs）或浓度为100 nM siRNA的裸siRNA培养。
图为：FA-siRNA-PPNPs的特性
结论：基于PK3和FA-PEG-PLGA的功能聚合物纳米颗粒FA-siRNAPPNPs用于Treatment RA。FA-siRNA-PPNPs在酸性pH中siRNA释放加速，表明其ph敏感性。siRNA向靶Inflammation组织的传递增加显示了FA-siRNA-PPNPs的fr靶向特性。此外，FA-siRNA-PPNPs对AIA大鼠模型RA有效。因此，FA-siRNA-PPNPs是一种siRNA递送平台。
