CY5-PEG-N3 荧光染料CY5-PEG-叠氮的制备
瑞禧生物2025-06-04   作者:ws   来源:
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产品介绍:

CY5 荧光染料:是一种发远红荧光的花青素荧光染料。其激发波长约为 649nm,发射波长约为 670nm。具有消光系数高、荧光亮、对 pH 不敏感等特点,且其远红光发射特性使得在生物成像中背景荧光较低,适合用于细胞成像、组织成像、流式细胞术和生物分析等多种生物科学研究领域,可标记蛋白、抗体、多肽、核酸分子、纳米粒等。

聚乙二醇(PEG):是一种亲水性聚合物。它能提供良好的水溶性,增强分子在生物体内的稳定性,延长标记分子的循环时间,同时降低免疫原性,减少与其他分子的非特异性相互作用。

叠氮基团(N3):是一种活性官能团,常用于点击化学反应,尤其是与炔基化合物发生 “铜催化叠氮-炔环加成”(CuAAC)反应,反应高效、高特异性且生物相容性好。通过该反应,CY5-PEG-N3 能够与带有炔基的生物分子或材料快速、定量结合,实现荧光标记或分子修饰。

 

制备:

1. PEG-N₃的合成

目标:将叠氮基团引入PEG链末端。

方法:

原料选择:

使用单甲氧基聚乙二醇(mPEG-NH₂,分子量如2000 Da)作为起始材料,其氨基端可与含叠氮的活性酯反应。

反应步骤:

将mPEG-NH₂与叠氮-N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS-N₃)在无水有机溶剂(如DMF或DMSO)中反应,生成PEG-N₃。

反应条件:室温,惰性气体(如氮气)保护,反应时间约12-24小时。

催化剂:通常无需额外催化剂,但可加入少量三乙胺(TEA)促进反应。

纯化:

通过透析(MWCO 3500 Da)或凝胶过滤色谱去除未反应的NHS-N₃和副产物,冻干后得到纯品PEG-N₃。

2. CY5的荧光标记

目标:将CY5荧光染料连接到PEG-N₃的另一端。

方法:

原料选择:

使用CY5-NHS酯(活性荧光染料)与PEG-N₃的氨基端反应。

反应步骤:

将PEG-N₃溶解于缓冲液(如PBS,pH 7.4),加入CY5-NHS酯,室温避光反应2-4小时。

反应机理:CY5-NHS酯的NHS基团与PEG-N₃的氨基发生亲核取代,形成稳定的酰胺键。

纯化:

通过超滤离心(MWCO 10 kDa)去除游离的CY5-NHS酯,或通过HPLC进一步纯化,得到纯品CY5-PEG-N₃。

 

名称:CY5-PEG-N3

产品规格:mg/g

保存方式:-20℃以下,避光,防潮

保质期限:12个月

用途:科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体

图:CY5

CY5 

 

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