细胞膜荧光探针DiR的使用方法与注意事项

2025-06-09 作者：ws 来源：

字号大小：

产品介绍：

DiR：全称为 1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'-Tetramethylindotricarbocyanine Iodide（1,1'-二辛十八基-3,3,3',3'-四甲基吲哚三碳菁碘化物），是一种脂溶性荧光染料，属于花菁类（Cyanine）染料家族。DiR 具有两个长链烷基（C18）和一个共轭的吲哚三碳菁体系，末端带有碘离子（I⁻）作为平衡离子。

DiR 具有亲脂性，其分子中的两个十八碳链能够插入到细胞膜的脂质双层中，在细胞内质膜中逐步扩散，在最佳浓度条件下可使整个细胞均匀染色。DiR 属于环境敏感型荧光染料，在水中荧光很弱，但与细胞膜或其他疏水性结构结合后，其荧光强度会明显增强。

使用方法与注意事项

使用方法：

探针溶解：DiR 通常以粉末形式提供，需用 DMSO 或乙醇溶解，再稀释至工作浓度（如 5-10 μM）。

细胞标记：将 DiR 溶液加入细胞培养基中，孵育 15-30 分钟（37°C，5% CO₂）。

洗涤与成像：标记后，用 PBS 洗涤细胞 2-3 次，去除未结合的探针，随后进行成像或流式分析。

体内成像：对于小动物实验，可通过尾静脉注射 DiR 标记的细胞或 LNP，使用 NIR-II 成像系统进行实时追踪。

注意事项：

探针浓度：过高浓度可能导致非特异性结合或细胞Poison 性，需优化工作浓度。

光照保护：DiR 对光敏感，需避光保存和使用，减少荧光淬灭。

细胞活性：标记后需检测细胞活性，确保 DiR 对细胞无明显影响。

成像条件：近红外二区成像需优化激发光源、滤波片和检测器参数，以获得最佳信号。