化学交联制备 2-辛炔酸-牛血清白蛋白的制备方法
瑞禧生物2025-06-25   作者:ZJ   来源:
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产品介绍:

2-辛炔酸-牛血清白蛋白以粉末形式存在,外观为淡黄至白色。其最理化性质是良好的水溶性,能迅速溶解于水中,形成均一溶液,溶解度可达数毫克每毫升,且溶解过程中无明显浑浊或沉淀产生。溶液的 pH 值接近中性,约为 7.0-7.2,离子强度稳定,保障了其在生物体系中的兼容性。由于牛血清白蛋白的存在,溶液具有一定的表面活性,可降低液体表面张力。在热稳定性方面,加热至 50℃以上,开始出现结构松散、变性现象,导致溶液黏度和浊度逐渐增加,影响其使用性能。

 

制备方法:

 

2-辛炔酸的活化:首先将 2-辛炔酸与 N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和二环己基碳二亚胺(DCC)等缩合剂在有机溶剂(如二氯甲烷)中反应。在这个过程中,DCC 作为脱水剂,促使 2-辛炔酸的羧基与 NHS 反应形成活性酯中间体。反应式大致如下:2-辛炔酸 + NHS + DCC 2-辛炔酸-NHS 活性酯 + DCU(二环己基脲,副产物)。此反应一般在低温(如 0-4℃)下进行,并在搅拌条件下反应数小时,以保证反应充分进行。反应结束后,通过过滤等方式去除生成的 DCU 沉淀。

 

与牛血清白蛋白的偶联:将活化后的 2-辛炔酸-NHS 活性酯溶液缓慢滴加到含有牛血清白蛋白的缓冲溶液(如 pH 7.2-7.4 的磷酸盐缓冲液)中。在适当的温度(一般为室温)和搅拌条件下,2-辛炔酸-NHS 活性酯的活性酯基团会与牛血清白蛋白分子中的赖氨酸残基的氨基发生亲核取代反应,形成稳定的酰胺键,从而实现 2-辛炔酸与牛血清白蛋白的共价结合。反应过程中,需要密切监测反应体系的 pH 值,可通过添加适量的酸碱溶液进行调节,以维持反应在合适的 pH 范围内进行。反应通常持续数小时至过夜,以确保偶联反应达到较高的转化率。

 

产物的分离与纯化:反应结束后,得到的混合溶液中含有未反应的 2-辛炔酸、牛血清白蛋白以及反应副产物等杂质。首先采用透析的方法,将反应液装入透析袋中,对合适的缓冲液(如 PBS 缓冲液)进行透析,通过透析可以去除小分子杂质如未反应的 2-辛炔酸、NHS 以及其他低分子量副产物。透析时间一般需要数小时至数天,期间需要多次更换透析外液,以保证透析效果。透析完成后,再利用凝胶过滤色谱等方法进一步纯化产物。凝胶过滤色谱根据分子大小对物质进行分离,2-辛炔酸-牛血清白蛋白复合物的分子量较大,会先于小分子杂质从色谱柱中洗脱出来。收集含有目标产物的洗脱液,通过冷冻干燥等方式去除溶剂,即可得到纯化的 2-辛炔酸-牛血清白蛋白粉末。在整个制备过程中,需要对每一步的产物进行质量检测,如通过高效液相色谱(HPLC)检测产物的纯度,通过质谱(MS)分析产物的分子量及结构,以确保最终得到高质量的 2-辛炔酸-牛血清白蛋白产品。

 

中文名称:2-辛炔酸-牛血清白蛋白

英文名称:2-Octynoic Acid-BSA

别称:2-OA-BSA、辛炔酸修饰的牛血清白蛋白

外观:类白色至淡黄色粉末

纯度:95%+

溶解性: 磷酸盐缓冲液(PBS

保存方式:-20℃,避光,防潮

保质期限:12个月

用途:科研

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体

图片:BSA

化学交联制备 2-辛炔酸-牛血清白蛋白的制备方法 

西安瑞禧生物科技有限公司主要经营的产品合成磷脂,脂质体的定制,包括各种空白对照脂质体,载药脂质体,装载DNA或小分子脂质体,长循环脂质体,阳离子脂质体,荧光脂质体及其他复杂的脂质体试剂。

 

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