在蛋白质药物开发领域，基于马来酰亚胺-聚乙二醇-羟基的蛋白质 PEG 化修饰技术，通过共价连接聚乙二醇（PEG）链提升蛋白质稳定性与Treatment 效果。其稳定性与生物活性的平衡评估，是决定修饰策略有效性的关键。

图为：MAL-PEG-OH结构式

MAL-PEG-OH 中，马来酰亚胺基团可特异性与蛋白质半胱氨酸残基的巯基反应，形成稳定的硫醚键，实现准确修饰；PEG 链则通过空间位阻效应减少蛋白质降解，降低免疫原性，延长体内半衰期。研究表明，经 PEG 化修饰的蛋白质在血清中的半衰期可延长数倍，有效减少给药频率。

稳定性评估需综合多维度指标。结构层面，圆二色谱与荧光光谱可监测蛋白质二级、三级结构变化，确保 PEG 化未破坏关键功能域；动力学研究中，加速降解实验通过高温、酸碱等严苛条件模拟，评估修饰后蛋白质抗变性能力。例如，重组人干扰素经 MAL-PEG-OH 修饰后，在 40℃环境下的降解速率降低，证实 PEG 链的保护作用。

图为：MAL结构式

生物活性评估则聚焦功能保留程度。酶类蛋白质可通过测定催化活性残留率判断活性损失，如 PEG 化脲酶的催化效率若维持在 80% 以上，表明修饰策略可行；对于抗体类蛋白质，ELISA 或细胞结合实验可检测其抗原识别能力。值得注意的是，PEG 链长度与修饰位点对活性影响明显：过长的 PEG 链可能遮蔽蛋白质活性中心，而选择远离功能域的修饰位点，可将活性损失控制在最小范围。

总体而言，MAL-PEG-OH 介导的蛋白质 PEG 化修饰需通过严谨的稳定性与生物活性评估，在延长半衰期与保留功能间寻求最优解，为临床蛋白质药物开发提供可靠策略。