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sulfo Cy5 (Me) SE 水溶性花菁染料CY5标记活性脂的制备方法

2025-07-03 作者：ZJ 来源：

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产品介绍：

Sulfo-Cyanine5 NHS ester 作为一款常用的荧光标记物。从外观辨认，其呈现暗蓝色粉末状。在溶剂兼容性方面，它在有机溶剂领域表现出色，易溶于 DMF、DMSO 和氯化物等。在体外实验常用的 DMSO 溶剂里，溶解度能达到≥ 26 mg/mL（34.49 mM）。由于其化学结构中部分基团的活泼性，该物质对环境较为敏感，高温和光照会加速其降解，影响荧光效果，因此需要低温避光保存，保证其在实验中的有效性。

制备方法：

花菁染料母体的合成：以适当的含氮杂环化合物为起始原料，通过缩合反应构建花菁染料的共轭结构骨架。例如，以 1,1,2-三甲基-1H-苯并 [e] 吲哚和 2-甲基-1H-苯并 [e] 吲哚为原料，在适当的催化剂（如对甲苯磺酸）和溶剂（如冰醋酸）存在下，与戊二醛发生缩合反应，形成具有五甲川链的花菁染料母体结构。此过程需准确控制反应温度、原料配比和反应时间，以保证产物的纯度和产率。

磺化反应：对花菁染料母体进行磺化修饰，引入磺酸基团以增强其水溶性。一般使用浓硫酸或发烟硫酸作为磺化试剂，在低温条件下（如 0-5℃）缓慢滴加到花菁染料母体的溶液中，反应过程中需不断搅拌并监测反应进程。磺化反应完成后，通过中和、沉淀、过滤等步骤分离出磺化产物。

NHS ester 活性基团的引入：将磺化后的花菁染料与 N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）在缩合剂（如二环己基碳二亚胺，DCC）的作用下进行反应。反应在有机溶剂（如二氯甲烷）中进行，控制反应温度和时间，使花菁染料的羧基与 NHS 的羟基发生缩合反应，形成 NHS ester 活性基团。反应结束后，通过柱层析等方法对产物进行纯化，去除未反应的原料、缩合剂以及副产物，最终得到高纯度的 Sulfo-Cyanine5 NHS ester 产品。