N3-PEG-MAL 作为一种重要的异双活性基团 PEG 衍生物，在生物医学领域应用较广，其硫醚键形成动力学对生物标记有着重要影响。

图为：N3-PEG-MAL结构式

N3-PEG-MAL 一端的叠氮基（N3）可参与点击化学反应，如与炔基在铜离子催化下高效反应，也能和 DBCO 直接反应，无需铜离子催化剂。另一端的马来酰亚胺（MAL）基团则具有高度特异性，在 pH 6.5-7.5 的温和条件下，能迅速与含巯基（-SH）的分子，如蛋白质半胱氨酸残基发生反应，形成稳定的硫醚键。PEG 链段赋予了分子良好的亲水性，不仅提升了修饰分子的溶解性，还能增强其生物相容性，减少多肽和蛋白质的免疫原性，同时抑制带电分子在修饰表面的非特异性结合。

在硫醚键形成动力学方面，MAL 与巯基的反应速率受多种因素调控。pH 值是关键因素之一，在 pH 6.5-7.5 时反应速率较快，这是因为在此 pH 区间，MAL 和巯基的活性较高，能有效促进反应进行。反应物浓度也影响明显，提高 MAL-PEG-N3 和含巯基分子的浓度，可加快反应进程，使硫醚键更快形成。此外，温度适当升高能增加分子热运动，加快反应速度，但过高温度可能导致分子结构变化，影响反应效果。

图为：马来酰亚胺结构式

在生物标记应用中，利用 N3-PEG-MAL 的硫醚键形成特性，可实现对生物分子的准确标记。例如在蛋白质标记中，通过 MAL 与蛋白质中的巯基结合，将叠氮基团引入蛋白质，后续再利用叠氮基的点击反应，连接上荧光染料等标记物，实现对蛋白质的可视化追踪，助力研究蛋白质在细胞内的定位、运输和相互作用等过程。在抗体药物偶联物（ADC）制备中，该物质可修饰抗体，先通过 MAL 与抗体的巯基形成硫醚键，再经点击反应连接药物分子，实现药物的靶向递送，提高Treatment 效果。