产品介绍:
Cy7-Dextran 是一种将 近红外荧光染料Cy7与葡聚糖(Dextran) 通过共价键结合形成的复合物,结合了Cy7的良好荧光性能和葡聚糖的生物相容性、水溶性及分子筛特性,应用于Blood vessels通透性研究、Lymph 系统成像、药物递送追踪及tumour微环境分析。
标记生物分子的步骤
(1)预处理:去除干扰物质
将氨基化 Cy7-Dextran 溶解于 MES 缓冲液(浓度 1-10 mg/mL),通过透析或离心超滤去除游离氨基试剂及杂质;
将含羧基的目标生物分子溶解于 MES 缓冲液(浓度 0.5-5 mg/mL),确保无氨基或巯基等干扰官能团(若有,需提前封闭)。
(2)活化目标生物分子的羧基
在目标生物分子的 MES 溶液中,按比例加入 EDC 和 NHS,室温避光搅拌,使羧基活化为 NHS 酯(提高与氨基的反应效率)。
(3)偶联反应:氨基化 Cy7-Dextran 与活化的生物分子反应
将活化后的目标生物分子溶液缓慢加入氨基化 Cy7-Dextran 溶液中,控制两者的摩尔比(根据偶联效率调整);
用 NaOH 调节混合溶液 pH,室温避光搅拌,使氨基(-NH₂)与活化的羧基(-CO-NHS)反应形成酰胺键。
(4)终止反应与纯化
加入过量 Tris-HCl 缓冲液(pH 7.4,终浓度 50 mM),室温孵育,终止反应(Tris 的氨基可与未反应的活化羧基结合);
透析法:将反应液装入透析袋(截留分子量需大于两者中较小分子的分子量,如 10 kDa),用 PBS 缓冲液透析,期间多次更换缓冲液,去除游离的 Cy7-Dextran、EDC、NHS 等杂质;
超滤法:使用离心超滤管(截留分子量同上),4℃离心(3000-5000 g),反复用 PBS 洗涤浓缩,进一步纯化复合物。
(5)产物验证
荧光检测:通过荧光分光光度计检测复合物的荧光强度(激发 743-750 nm,发射 767-775 nm),确认 Cy7 标记成功;
电泳验证:若目标生物分子为蛋白质,可通过 SDS-PAGE 电泳观察复合物的分子量变化(较原蛋白偏大);
高效液相色谱(HPLC):分析产物纯度,确认无游离 Cy7-Dextran 或未反应的生物分子。
名称:Cy7-Dextran
产品规格:mg/g
纯度:95%+
保存方式:-20℃以下,避光,防潮
保质期限:12个月
用途:科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体
图:Cy7-Dextran
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