细胞内吞作用是细胞摄取大分子和颗粒物质的关键方式,对细胞的存活、代谢和信号传导至关重要。探究细胞内吞途径有助于深入理解细胞生理病理过程,CY7-CPT 作为一种荧光标记工具,为该领域研究带来了新契机。
CY7(花菁染料 7)属于近红外荧光染料,具有光学性质。其发射波长处于近红外区域,该波段光对生物组织穿透性强,能减少组织自发荧光干扰,实现深层组织或细胞内的清晰成像。同时,CY7 具备较高的荧光量子产率与良好的光稳定性,可在长时间成像过程中维持稳定荧光信号,满足动态监测需求。CPT(喜树碱)是一种天然抗cancer药物,其与 CY7 结合形成的 CY7-CPT,不仅保留了 CPT 的生物活性,还赋予了其荧光示踪能力。
图为:CY7-CPT结构式
在细胞内吞途径研究中,CY7-CPT 可用于标记特定分子。将 CY7-CPT 与待研究的目标分子(如受体、配体或药物载体等)连接,通过荧光显微镜、共聚焦显微镜或流式细胞仪等设备,能够实时监测目标分子在细胞内的动态变化。例如,当 CY7-CPT 标记的配体与细胞表面受体结合后,可观察到配体 - 受体复合物如何在细胞膜上聚集、内陷形成内吞小泡,以及内吞小泡在细胞内的运输轨迹、与早期内体、晚期内体和溶酶体等细胞器的融合过程。利用不同时间点的荧光成像,能构建出目标分子内吞途径的动态图谱,从而揭示细胞内吞的详细机制。
CY7-CPT 还可用于区分不同内吞途径。细胞存在多种内吞方式,如网格蛋白介导的内吞、胞膜窖介导的内吞、巨胞饮等,不同途径有不同的分子机制和动力学特征。通过使用针对特定内吞途径的抑制剂,结合 CY7-CPT 标记观察,若某抑制剂处理后,CY7-CPT 标记分子的内吞过程被抑制,可推断该分子主要通过此途径内吞。这种方法有助于明确不同分子在细胞内吞过程中所采用的具体途径,为深入理解细胞内吞途径的多样性和特异性提供有力证据。
图为:喜树碱结构式
CY7-CPT 作为荧光标记工具,在细胞内吞途径研究中展现出强大优势,极大推动了对细胞摄取物质机制的认知,为相关疾病研究和药物开发提供了关键技术支撑。