亲水性荧光标记物 SH-PEG5000-FITC的制备方法
瑞禧生物2025-07-24   作者:ZJ   来源:
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产品介绍:

SH-PEG5000-FITC 的理化性质核心在于巯基的高反应活性。巯基(-SH)在 pH 7.4 条件下的解离度约 30%,与马来酰亚胺的反应速率常数达 3.2×10³ L/(mols)2 小时内反应完成率超 95%。在空气中的氧化稳定性受温度影响,4℃储存 30 天二硫键生成率<10%,而 37℃时氧化率升至 40%,需添加 0.1% DTT 维持活性。巯基与金纳米颗粒的结合能为-45 kJ/mol,可在 10 分钟内完成表面修饰,修饰效率比氨基修饰高 2 倍,是纳米材料功能化的高效偶联剂。

 

制备方法:

 

原料准备:准备纯度较高的聚乙二醇 5000PEG5000)、巯基化试剂(如巯基乙醇、二硫苏糖醇等)、异硫氰酸荧光素(FITC)以及相关溶剂(如二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇等)和催化剂(如三乙胺等)。首先对 PEG5000 进行预处理,去除可能存在的杂质和水分,确保后续反应的顺利进行。

 

巯基化反应: PEG5000 溶解在适当的溶剂中,加入巯基化试剂和催化剂,在一定温度下(通常为室温至 50℃)搅拌反应一段时间(数小时至数十小时)。通过控制反应条件,使巯基化试剂与 PEG5000 的一端羟基发生反应,引入巯基,生成 SH-PEG5000。反应结束后,采用透析、沉淀等方法对产物进行纯化,去除未反应的原料和副产物。

 

FITC 标记反应:将纯化后的 SH-PEG5000 溶解在合适的溶剂中,加入 FITC,在避光条件下,控制反应温度(一般为室温)和 pH 值(通常为碱性环境,以促进异硫氰酸酯与羟基或氨基的反应),搅拌反应一定时间(通常为 12-24 小时)。FITC 中的异硫氰酸酯基团(-N=C=S)与 SH-PEG5000 分子中的羟基或其他活性位点发生反应,形成共价键,实现 FITC 的标记。

产物纯化与表征:反应完成后,通过凝胶渗透色谱(GPC)、透析等方法对产物进行进一步纯化,去除未反应的 FITC 和其他杂质。

 

中文名称:巯基-聚乙二醇5000-荧光素

英文名称:SH-PEG5000-FITC

别称:Fluorescein-PEG-Thiol、荧光素聚乙二醇巯基、FITC-PEG-SH

外观:橙色或黄色液体、半固体或固体

纯度:95%+

溶解性: 水、DMSODMF

保存方式:-20℃,避光,防潮

保质期限:12个月

用途:科研

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体

图片:

亲水性荧光标记物 SH-PEG5000-FITC 

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