Bio-anthocyanin（生物花青素）的抗氧化活性是其核心生物功能之一，准确评价其活性需结合多种方法。目前常用的评价方法可分为体外化学法和细胞 / 动物模型法，各有其原理与适用场景。

体外化学法操作简便、快速，适合初步筛选。其中，DPPH 自由基清除法通过检测花青素对稳定自由基 DPPH 的还原能力，以 IC₅₀值（清除 50% 自由基所需浓度）衡量活性。该方法灵敏度高，但受溶剂影响较大，且仅反映氢转移能力。ABTS 法与 DPPH 原理类似，但更适合水溶性样品，反应体系 pH 适用范围更广，常作为 DPPH 法的补充。

图为：Bio-anthocyanin结构式

铁离子还原 / 抗氧化力测定（FRAP 法）基于花青素还原 Fe³⁺为 Fe²⁺的能力，通过显色反应定量。该方法稳定性好，但仅反映抗氧化剂的还原能力，无法模拟生物体系中的氧化过程。此外，氧自由基吸收能力（ORAC）法通过检测荧光探针被自由基氧化后的荧光衰减程度，更接近生物体内的氧化机制，被认为是较全面的体外评价方法，但操作较复杂，耗时较长。

细胞模型法可反映生物体内的实际抗氧化效果。如通过检测细胞内活性氧（ROS）水平、脂质过氧化产物（MDA）含量，或抗氧化酶（SOD、GSH-Px）活性变化，评价花青素对细胞氧化损伤的保护作用。该方法更贴近生理环境，但受细胞种类、培养条件影响较大，且需排除花青素自身颜色对检测的干扰。动物模型法则通过建立氧化应激模型，检测血清或组织中的抗氧化指标，综合评价体内活性。其结果最具生理意义，但实验周期长、成本高，适合验证体外筛选出的高活性样本。

图为：生物素结构式

综合来看，体外化学法适合大规模初筛，ORAC 法因更接近生物机制而更具参考价值；细胞模型可弥补化学法的局限性，反映细胞层面的抗氧化效果；动物模型则是最终验证体内活性的金标准。实际研究中需结合多种方法，才能全面评价 Bio-anthocyanin 的抗氧化活性。