FITC-cRGD 异硫氰酸荧光素标记cRGD的制备原理及过程
瑞禧生物2025-06-18   作者:ws   来源:
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产品介绍:

cRGD 的结构与特性

氨基酸序列:cRGD(环化精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)的典型结构为 cyclo (-RGDfK-),通过二硫键或酰胺键环化(如 cyclo [RGDyK]),相比线性 RGD 肽具有更高的受体亲和力与稳定性。

靶向机制:特异性结合整合素家族受体(如 αvβ3、αvβ5),该受体在tumourBlood vessels内皮细胞、tumour细胞表面高表达,而在正常组织中低表达,是tumour靶向的经典配体。

FITC 标记的技术要点

标记位点:通过 cRGD 的赖氨酸(Lys)侧链氨基或 N 端氨基与 FITC 的异硫氰酸酯基团偶联,形成稳定硫脲键,标记后保留环化结构的完整性。

荧光特性:标记后发射绿色荧光(激发峰 495nm,发射峰 520nm),可通过荧光显微镜、流式细胞术或活体成像系统追踪。

 

制备原理及过程

反应原理

基于 FITC 异硫氰酸基团与 cRGD 肽分子链上氨基的亲核加成反应,在合适的条件下形成硫脲键,实现 FITC 对 cRGD 肽的标记。

具体步骤

1 cRGD 肽溶液配制:

将 cRGD 肽溶解在适当的缓冲液中,如磷酸盐缓冲液(PBS,pH 7.4),配制成一定浓度的溶液。例如,可配制成 1-5mg/mL 的 cRGD 肽溶液,轻轻搅拌至完全溶解。

2 FITC 溶液配制:

将 FITC 溶解在 DMSO 中,配制成一定浓度的 FITC 溶液。例如,可配制成 10mg/mL 的 FITC-DMSO 溶液。

3 反应过程:

在避光条件下,将 FITC 溶液缓慢滴加到 cRGD 肽溶液中,边滴加边搅拌。控制反应温度(一般为 4℃或室温)和反应时间(通常为数小时,如 2-4 小时),使反应充分进行。反应过程中,可加入适量的催化剂(如三乙胺)来促进反应的进行,同时调节溶液的 pH 值至合适的范围(如 pH 7.5-8.5)。

4 纯化步骤:

反应结束后,采用透析或高效液相色谱(HPLC)等方法对产物进行纯化。透析可以利用半透膜将小分子杂质(如未反应的 FITC)与目标产物分离;HPLC 则可以根据分子量、电荷等性质进行分离,得到高纯度的 FITC-cRGD。纯化后的产物可进行分装,并在 -20℃或 -80℃下保存。

 

名称: FITC-cRGD  

产品规格:mg/g
纯度:95%+

保存方式:-20℃以下,避光,防潮

保质期限:12个月

用途:科研
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体

图:cRGD

cRGD 

 

西安瑞禧生物科技有限公司供应聚合物、纳米材料、PEG衍生物、环糊精、量子点、小分子材料和二亲嵌段共聚物等,还可供应冠醚类产品,大环醚类有机化合物,环糊精,杯芳烃,柱芳烃,杯吡咯,紫晶类(4,4-联吡啶阳离子盐)衍生物,环状或笼状化合物,环碳,环碳氧化物和索烃和轮烷等大环化合物。

 

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