HA-N3（叠氮功能化透明质酸）的稳定性与反应活性受 pH 值影响明显，其分子结构中的糖苷键、羧基及叠氮基团对酸碱环境敏感，进而影响应用效果。

图为：HA-N3结构式

在酸性条件（pH<5.0）下，HA-N3 的糖苷键易发生水解断裂，导致分子量下降，溶液粘度随时间降低。实验显示，pH=3.0 时，HA-N3 在 48 小时内分子量损失达 30%，且叠氮基团可能与质子结合形成不稳定中间体，降低其与炔基的反应活性。此时点击化学反应速率常数较中性条件下降约 40%，产物产率明显降低。

中性至弱碱性环境（pH6.5-8.0）为 HA-N3 的最佳稳定区间。透明质酸主链的羧基在此范围内部分解离，形成负电荷排斥效应，减少分子间聚集，溶液稳定性良好。叠氮基团保持中性亲核状态，与 DBCO 等炔基化合物的环加成反应效率最高，二级反应速率常数可达 10²M⁻¹s⁻¹ 以上，且反应选择性良好，副产物少于 5%。

图为：透明质酸结构式

强碱性条件（pH>9.0）下，HA-N3 的羧基完全解离，虽能维持主链稳定性，但叠氮基团易发生亲核取代反应，生成无反应活性的氨基衍生物。同时，高浓度 OH⁻会攻击糖苷键，导致主链缓慢降解，72 小时后溶液中游离叠氮离子浓度上升 25%，严重抑制点击化学反应。

实际应用中，需根据场景调控 pH：生物成像探针制备宜选用 pH7.0-7.4 的磷酸盐缓冲液，确保标记效率；长期储存则可调节至 pH6.0，通过抑制水解反应延长保质期。这一特性为 HA-N3 在 pH 响应型药物递送系统中的设计提供了依据，可利用tumor微环境的弱酸性（pH6.5）触发载体降解与药物释放。