利用 DBCO-glucan 实现细胞内特定分子的荧光标记
瑞禧生物2025-06-12   作者:lkr   来源:
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在细胞生物学研究中,对细胞内特定分子进行准确荧光标记是洞察细胞功能和疾病机制的关键手段。DBCO-glucan(二苯并环辛炔 - 葡聚糖)凭借独特性质,为这一领域带来新的突破。

DBCO-glucan结构式 

图为:DBCO-glucan结构式

 

DBCO,即二苯并环辛炔,具有高度反应活性,能与含叠氮(-N₃)基团的分子发生高效、特异性的无铜点击化学反应。该反应无需金属催化剂,避免了潜在细胞有害性,且反应条件温和,不会破坏生物分子原有结构与活性。葡聚糖(glucan)是由葡萄糖单体聚合而成的多糖,具有良好的生物相容性与水溶性,可作为理想的载体,将 DBCO 引入细胞内环境。

 

利用 DBCO-glucan 实现细胞内特定分子荧光标记,首先需对目标分子进行叠氮化修饰。对于蛋白质、核酸等生物大分子,可通过化学偶联或生物正交反应,在其结构上引入叠氮基团。随后,将叠氮化修饰的目标分子与 DBCO-glucan 混合,在适宜的缓冲溶液中,DBCO 与叠氮基团迅速反应,形成稳定的三唑环连接,实现二者共价结合。若需荧光示踪,可预先将荧光染料(如 Cy3、Cy5 等)与 DBCO-glucan 连接,或使用带有荧光标记的叠氮化物修饰目标分子。当 DBCO-glucan 与目标分子结合后,即可凭借荧光信号对特定分子进行追踪与检测。

葡聚糖结构式 

图为:葡聚糖结构式

 

这种标记策略优势明显。DBCO-glucan 良好的生物相容性使其在细胞内环境中稳定存在,不影响细胞正常生理功能。同时,基于点击化学的高度特异性,能确保荧光标记仅发生在目标分子上,极大降低背景干扰,提升标记准确性与灵敏度。在细胞成像中,可清晰观察到特定分子在细胞内的分布、转运及与其他分子的相互作用过程,为深入研究细胞内分子机制提供有力工具,助力疾病早期诊断与Treatment 靶点的发现。