生物膜结构复杂且功能多样，其结构解析对理解细胞生理、病理过程至关重要。DPPE-NBD（7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑-4-基-二棕榈酰磷脂酰乙醇胺）标记技术，为生物膜结构解析提供了高效手段。

DPPE-NBD 由二棕榈酰磷脂酰乙醇胺（DPPE）与 NBD 荧光基团连接而成。DPPE 作为磷脂，具有良好的生物相容性，是构成生物膜的重要脂质成分，能自然融入生物膜的脂质双分子层。NBD 荧光基团则赋予分子荧光特性，其在水中荧光微弱，而进入疏水环境（如生物膜脂质层）后，荧光增强，且对微环境变化敏感，激发波长适配常见共聚焦显微镜等设备的激光光源，便于检测观察。

图为：DPPE-NBD 结构式

在解析生物膜脂质双分子层结构时，DPPE-NBD 可充当 “分子探针”。将其加入生物膜模拟体系或细胞培养液中，DPPE-NBD 凭借与天然磷脂相似的结构，迅速整合到生物膜内。利用荧光显微镜成像，能清晰观察到 DPPE-NBD 在膜中的分布，揭示脂质双分子层的整体形态、厚度及完整性。例如，通过对比不同条件下（如温度、pH 值改变）DPPE-NBD 标记的生物膜荧光图像，可分析环境因素对脂质双分子层排列紧密程度、流动性的影响。当温度升高，膜中 DPPE-NBD 荧光强度及分布变化，表明脂质双分子层流动性增强，分子排列更松散。

解析生物膜上脂筏结构，DPPE-NBD 同样关键。脂筏是生物膜上富含胆固醇和鞘磷脂的微区，在细胞信号转导等过程中起重要作用，但因尺寸微小且与周围膜成分相似，解析困难。DPPE-NBD 可优先聚集在脂筏区域，与脂筏内脂质相互作用。结合荧光共振能量转移（FRET）技术，以 DPPE-NBD 为供体，选择在脂筏中特异性定位的荧光分子为受体，当两者距离合适，发生 FRET 现象，通过检测 FRET 效率变化，可准确确定脂筏边界、大小及内部脂质与蛋白质的相互作用情况。

图为：DPPE结构式

不过，应用 DPPE-NBD 标记技术也面临挑战。如标记浓度过高，可能改变生物膜原有物理化学性质，影响研究准确性；复杂生物体系中，其他荧光物质或杂质可能干扰 DPPE-NBD 荧光信号。但总体而言，DPPE-NBD 标记技术以其独特优势，为生物膜结构解析打开新窗口，随着技术完善，将助力深入探索生物膜奥秘，推动生物医学、细胞生物学等多领域发展。